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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BK-P64635 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
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禽呼腸孤病毒RT-PCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64635 |
PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液
濃度和純度。
公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative
real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
中國倉鼠卵巢細胞;CHO 癌細胞，ZR-75-30細胞 SVP細胞，VERO衍生株氯普噻噸Chlorprothixene質量規(guī)格：>98%,BR
胚腎細胞;293 [HEK-293]咪唑（標準品）Imidazole質量規(guī)格：檢查
HA Others H6N1 甲型 H6N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) 瑞他帕林;瑞他莫林Retapamulin質量規(guī)格：>99%,BR
星形膠質細胞HA乳果糖（標準品）Lactulose質量規(guī)格：含量測定
CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 細胞裂解液 (陽性對照) 酞丁安（標準品）FTIBAMZONE質量規(guī)格：UV法含量測定
谷胱甘肽過氧化物酶分析試劑盒GPX7-差向 10-去乙?；仙来?span>7-Epi 10-Desacetyl Paclitaxel質量規(guī)格：美國進口
TLK2 Others Human TLK2 / PKU-ALPHA (aa 397-772 ) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (S,S)-帕洛諾司瓊鹽酸鹽-d4(S,S)-Palonosetron Labeled d4質量規(guī)格：美國進口
結直腸腺癌細胞;COLO 320DM [COLO320DM]2'-O-(2-甲氧乙基）腺苷2'-O-(2-Methoxyethyl)adenosine質量規(guī)格：美國進口
CBRH-7919細胞，細胞 未分化細胞,HGC-27細胞 牛陀螺狀細胞;BT(S)-腺苷，環(huán)3',5'-（氫化硫代1酸酯）三乙基胺(S)-Adenosine, cyclic 3',5'-(hydrogenphosphorothioate) triethylammonium 質量規(guī)格：美國進口
tTA基因修飾的小鼠*癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C52'-脫氧-β-L-腺苷2'-Deoxy-β-L-adenosine 質量規(guī)格：美國進口
山羊皮膚細胞;WGS1齊墩果酸Oleanolic acid質量規(guī)格：HPLC≥95%，BR
CAMK4 Others Mouse 小鼠 CAMK4 / CaMKIV 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 齊墩果酸(高98%）Oleanolic acid質量規(guī)格：HPLC≥98%，BR
CL-0137NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維5×106cells/瓶×2齊墩果酸(標準品）Oleanolic acid質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品
HGC-27細胞 細胞，HelaS3細胞 ES-2(卵巢透明細胞癌細胞)莽草酸Shikimic acid質量規(guī)格：≥98%,BR
小細胞;NCI-H2227莽草酸(標準品)Shikimic acid質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
SK-N-SH, 神經(jīng)母細胞瘤細胞 低轉移細胞,96-C細胞 PLC/PRF/5(亞力山大細胞)槲皮素 質量規(guī)格：HPLC>85%,二水BRQuercetin dihydrate
小鼠*瘤細胞;Fox-NY槲皮素(標準品）質量規(guī)格：HPLC>98.0%,標準品Quercetin
PCSK9 Others Mouse 小鼠 PCSK9 / NARC1 細胞裂解液 (陽性對照) 銪標準溶液（1000μg/ml）質量規(guī)格：1000μg/ml Europium standard
大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r5氟離子（F-）標準溶液（500mg/L,溶劑：水）質量規(guī)格：500mg/L,溶劑：水 Fluoride standard
CSNK2A1 Others Mouse 小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 氟離子（F-）標準禽呼腸孤病毒RT-PCR試劑盒溶液（1000mg/L,基體:水）質量規(guī)格：1000mg/L,基體:水 Fluoride standard
