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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP4314 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
肯塔基沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 | Salmonella kentuckyPCR | BKP4314 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：肯塔基沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
4β-Hydroxywithanolide E 中文名：4β-羥基醉茄內(nèi)酯E 分子式：C28H38O8 植物二(MDA)測(cè)定試劑盒(比色法)
4-Oxododecanedioic acid 中文名： 分子式：C12H20O5 維生素E（VitaminE）測(cè)定試劑盒（比色法）
4-O-(3-nitropropanoyl)corollin 中文名： 分子式：C18H24N4O18 超微量Na+K+–ATP酶測(cè)定試劑盒
4-Methylamino-3-nitrobenzoic acid 中文名： 分子式：C8H8N2O4 氧化酶（XOD）測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
4-Methyl-2-propyl-1H-benzimidazole-6-carboxylic acid 中文名： 分子式：C12H14N2O2 葡萄糖氧化酶（GOD）測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣
桿菌(YP)核酸檢測(cè)試劑盒 48T 3β-Hydroxyergost-5-en-7-one 156767-69-0 中文名： 分子式：C28H46O2
噬中性及細(xì)胞活化肽 -2(NAP-2) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 Testosterone isocaproate 中文名：異己酸睪酮 分子式：C25H38O3
噬酸性粒細(xì)胞趨化因子 -2(Eotaxin-2) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol 3090-70-8 中文名：3-乙酰基-5α-雄烷二醇 分子式：C21H34O3 度：98.0%
嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白 英文名稱： eosinophil cationic protein 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： ECP 3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 14858-07-2 中文名： 分子式：C28H44O3 度：97.0% 關(guān)鍵詞： 靈芝; 麥角甾烷; 對(duì)照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子 (Eotaxin) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國(guó) Biosource 3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 88191-14-4 中文名： 分子式：C28H44O4 度：97.0% 關(guān)鍵詞： 靈芝; 麥角甾烷; 對(duì)照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
肯塔基沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸柔紅霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Daunorubicin HCl
人少突膠質(zhì)細(xì)胞HO鹽酸柔紅霉素(進(jìn)口)質(zhì)量規(guī)格：USP,進(jìn)分sigmaD8809 Daunorubicin HCl
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人細(xì)胞，A-704細(xì)胞 AGS(胃腺癌細(xì)胞)達(dá)格列嗪;達(dá)格列凈質(zhì)量規(guī)格：>97%，BR，生化試劑級(jí)Dapagliflozin
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y甘草查而酮 A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量≥98.0%，標(biāo)準(zhǔn)品Licochalcone A
FGF18 Others Mouse 小鼠 FGF18 / FGF-18 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三氯卡班質(zhì)量規(guī)格：>98.0%Triclocarban
人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLSBES；2-溴乙基磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格：>98.5% 2-bromoethanesulphonate
JB6-C41細(xì)胞，小鼠皮膚細(xì)胞 SHG44(細(xì)胞) 犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wildBICINE；N,N-二羥乙基甘氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%BICINE
EFNA1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)BES salt; N,N-二(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格：>99%BES Salt
LS 180(人腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 原代上皮細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many types of cells包裝：1mlBES free acid; N,N-(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸質(zhì)量規(guī)格：>99%BES free acid
人上皮細(xì)胞HBEpiCBz-2'-脫氧胞苷亞1酰胺單體質(zhì)量規(guī)格：>98%Bz-dC Phosphoramidite
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
