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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP4342 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
血吸蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒說明書 | Schistosoma spp.PCR | BKP4342 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：血吸蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
5-Hydroxymethyl-2-furoic acid 中文名：5-羥甲基-2-糠酸 分子式：C6H6O4 細(xì)胞間粘附分子1 英文名稱： Human Iercellular Adhesion Molecule 1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： ICAM-1
5-Formyl-2-furylboronic acid 中文名： 分子式：C5H5BO4 干擾素α受體 英文名稱： Human Ierferon α Receptor 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： IFNαR
5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole 中文名： 分子式：C7H9N3O3 樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1 英文名稱： insulin-like growth factors binding protein-1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： IGFBP-1
5-Fluorouracil 中文名： 分子式：C4H3FN2O2 樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2 英文名稱： insulin-like growth factors binding protein-2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： IGFBP-2
5'-Deoxy-5-fluorocytidine 中文名： 分子式：C9H12FN3O4 樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3 英文名稱： insulin-like growth factors binding protein-3 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： IGFBP-3
兔促卵泡素(rabbit FSH) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester 中文名： 分子式：C18H27N3O4 度：98.0%
兔雌二醇(rabbi E2) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Amino-1-naphthol 中文名：5-氨基-1-萘酚 分子式：C10H9NO 度：98.0%
兔超氧化物歧化酶 英文名稱： Rabbit Superoxide Dismase 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： SOD 4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide 中文名：4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚 分子式：C20H16OS
兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 4-Difluoromethoxy-3-hydroxybenzaldehyde 中文名： 分子式：C8H6F2O3
兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-Acetyl-3-chloro-10,11-dihydro-5H-dibenz[b,f]azepine 中文名： 分子式：C16H14ClNO
血吸蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒說明書NRG1 Others Canine 狗 NRG1-alpha Protein (ECD) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 拉呋替丁（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Lafutidine
人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞RNAHPAF miRNA5 μg托可索侖/維生素E聚乙二醇琥珀酸酯質(zhì)量規(guī)格：VE含量≥260.00mg/g as dl-α-tocopherolTocofersolan,VE-TPGS
兔晶體上皮細(xì)胞永生系;N/N1003A(RLE) 細(xì)胞，HCT 116細(xì)胞 M-1細(xì)胞，小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)鹽酸甲氧那明質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,CPMethoxyphenamine HCl
人胚肺細(xì)胞系;KuMA安倍生坦質(zhì)量規(guī)格：>98%Ambrisentan
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 安倍生坦(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ambrisentan
HeLa 229 人細(xì)胞5-FAM, SE；5-羧基熒光素琥珀酯質(zhì)量規(guī)格：0.95-Carboxyfluorescein N-succinimidyl ester
EA.hy926人臍細(xì)胞融合細(xì)胞 EA.hy926 human umbilical vein cell fusion cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS5,6-FAM；5(6)-羧基熒光素質(zhì)量規(guī)格：0.955(6)-Carboxyfluorescein
TNFSF9 Protein Mouse 重組小鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (His 標(biāo)簽)5(6)-FAM, SE; 5(6)-羧基熒光素琥珀酯質(zhì)量規(guī)格：>90%5(6)-FAM, SE
大鼠條紋神經(jīng)元(RNs)(1×106) C6, 大鼠腦細(xì)胞 RattusS-腺苷-L-蛋氨酸;S-腺苷甲硫氨酸質(zhì)量規(guī)格：BR,度>96%,干品腺苷蛋氨酸>49%S-adenosyl-L-mine (SAM)
人羊膜細(xì)胞;WISH5(6)-ROX ;5(6)-羧基-X-羅丹明鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>95%,進(jìn)分5(6)-Carboxy-X- rhodamine; 5(6)-ROX
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
