|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP4143 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
副病毒5型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Parainfluenza Virus 5（PIV5)5PCR | BKP4143 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：副病毒5型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric acid 10097-02-6 中文名：2,2-二羥甲基丁酸 分子式：C6H12O4 度：98.0% 小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(mouse NGF) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane 2024-88-6 中文名：2,2-雙(4-氯甲酰氧苯基)丙烷 分子式：C17H14Cl2O4 度：98.0% 小鼠核因子κB抑制蛋白α（IKB-α）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2,2-Bis(3-amino-4-hydroxyphenyl)hexafluoropropane 83558-87-6 中文名：2,2-雙(3-氨基-4-羥苯基)六氟丙烷 分子式：C15H12F6N2O2 度：98.0% 小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒 48T/96T 試劑盒 組裝/原裝
2,2'-Bicinchoninic acid 1245-13-2 中文名：2,2'-二辛可寧酸 分子式：C20H12N2O4 度：98.0% 小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2,2'-Anhydro-5-methyluridine 22423-26-3 中文名：2,2'-O-脫水-5-甲基尿嘧啶核苷 分子式：C10H12N2O5 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit兔子促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 2-Amino-4-chlorobenzothiazole 中文名：2-氨基-4-氯苯并噻唑 分子式：C7H5ClN2S
rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 兔子促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 20-Hydroxyecdysone 中文名：20-羥基蛻皮甾酮 分子式：C27H44O7 度：98.0%
rabbitFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 2-Amino-3-chloro-1,4-naphthoquinone 2797-51-5 中文名：2-氨基-3-氯-1,4-萘醌 分子式：C10H6ClNO2
rabbitFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit 兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 2,4-Dihydroxy-3-nitropyridine 中文名： 分子式：C5H4N2O4 度：98.0%
RabbitFibrinogen,FbgELISAKit兔血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 2-Amino-3-Formylchromone 中文名：2-氨基-3-甲酰基色原酮 分子式：C10H7NO3
副病毒5型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B 人細(xì)胞，SK-HEP-1細(xì)胞 95-D(高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)醋酸戈舍瑞林 質(zhì)量規(guī)格：BR,>98%Goserelin Acetate
人細(xì)胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]醋酸亮丙瑞林 質(zhì)量規(guī)格：BR,>98%Leuprolide Acetate
TDGF1 Others Human 人 TDGF1 / CRGF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 醋酸地塞米質(zhì)量規(guī)格：>98%,BP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Dexamethasone Acetate
CM-H030人外周血白細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL醋酸地塞米（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Dexamethasone Acetate
MAPK12 Others Human 人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 甲氧芐啶質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,超,BP2010,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Trimethoprim
H22 小鼠細(xì)胞2-氯蒽(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)2-Chloroanthracene
DSC2 Others Human 人 DSC2 / Desmocollin-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 9,10-二氯蒽(>96.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)9,10-Dichloroanthracene
人正常肝細(xì)胞;L-021,5-二溴蒽(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)1,5-Dibromoanthracene
HA Others H5N2 甲型 H5N2 (A/osich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1,8-二蒽(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)1,8-Diiodoanthracene
NCI-H292 人細(xì)胞(結(jié)轉(zhuǎn)移)9-酮基利培酮質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口9-Keto Risperidone
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
