|
| 產地 | 進口、國產 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP4098 |
| 用途 | 公司產品僅用物科研 |
| 包裝規格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
諾如病毒2型PCR檢測試劑盒說明書 | Norwalk Viruses G2(NV2)G2RTPCR | BKP4098 |
技術服務內容：
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優勢：
1. 特異性：諾如病毒2型PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
2. 重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3. 靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
GLYCOPROTEIN Others Sudan ebolavirus 蘇丹病毒 Glycoprotein / GP 人細胞裂解液 (陽性對照) YGC瓊脂shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫升
人肺巨細胞癌低轉移細胞株;PG-LH72(5H)-同 98% 2(5 H)-THIOPHqNONq 3324/3/3
敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1 貓腎細胞，CRFK細胞 Cyc-Tag(S49)細胞，小鼠T細胞瘤細胞硫柳鈉shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克
人胚;HFL-I刃天青shēng huà shì jì容量：100克
CRP Others Mouse 小鼠 CRP / PTX1 人細胞裂解液 (陽性對照) PonceauS 10g/25g/100ml Amresco分裝
C2C12, 小鼠肌原細胞胰多肽，大鼠Pancreatic Polypeptide, rat質量規格：>95%,BR
EB病毒轉化的人B細胞(傣族);KM9403 人臍動脈平滑肌細胞完全培養基 100mL甲狀旁腺激素（1-38），人Parathyroid Hormone (1-38),human質量規格：>95%,BR
上皮細胞生長添加物BEpiCGS五肽胃泌素Pentagastrin質量規格：>95%,BR
FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 人細胞裂解液 (陽性對照) 肽YY，人Peptide YY, Human質量規格：>95%,BR
人癌細胞;MCF7肽YY，犬，大鼠，小鼠，豬Peptide YY (canine, mouse,porcine, rat)質量規格：>95%,BR
諾如病毒2型PCR檢測試劑盒說明書FGF9 Protein Canine 重組狗 FGF9 / FGF-9 蛋白 (Fc 標簽)丙泊酚葡萄糖苷酸Propofol Glucuronide質量規格：美國進口
A3(人T細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml4-羥基丙泊酚4-Hydroxy Propofol質量規格：美國進口
人滑膜細胞cDNAHS cDNA2,2-二甲基-4-異丙基-1,3-苯并二茂2,2-Dimethyl-4-isopropyl-1,3-benzodioxole質量規格：美國進口
TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-羥基丙泊酚4-O-β-D-葡萄糖苷酸4-Hydroxy Propofol 4-O-β-D-Glucuronide質量規格：美國進口
人內臟脂肪細胞完全培養基 100mL4-羥基丙泊酚1-O-β-D-葡萄糖苷酸4-Hydroxy Propofol 1-O-β-D-Glucuronide質量規格：美國進口
C2C12, 小鼠肌原細胞酸鋇shēng huà shì jì容量：RT500毫升
RSC, 大鼠雪旺細胞 NCYC 234[IPAZSC 148]細胞 COS-7(SV40 轉化的非洲綠猴腎細胞)姆沙伯 W AW ChroMosorb W cW;
人細胞;CNE-2Z重蒸酚 () Phenol * 250ML 通用試劑
DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人細胞裂解液 (陽性對照) 氫-鉀ATP酶測試盒50支/包RT
人導管癌細胞;ZR-75-1(DNA高分子量標準)
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
