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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3764 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬嗜血桿菌PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Haemophilus suisPCR | BKP3764 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：豬嗜血桿菌PCR檢測試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
SERPINB12 Others Mouse 小鼠 SerpinB12 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) LACTOSEMONOHYDRATE乳糖單水合物美國國家處方級,ACS級,英國藥典,歐洲藥典級,日本藥典級白色至米白色粉末RTsigma
人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B3-羌基聯(lián)本;間本基酚 3-xy7noxybiphqnyl;3-Phqnylphqnol;3-xy7noxydiphqnyl;M-xy7noxybiphqnyl 280-21-8
SiHa細(xì)胞，子細(xì)胞 人母系細(xì)胞,CNE-2Z細(xì)胞 CL-0240V79(倉鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×25MGPNPPSUBSTRATETAETSPNPP試劑級淺黃色COLDsigma
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-p7CBZ-D-Valine芐氧羰基-D-纈酸10克BR，99%
FIGF Others Human 人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (L-蘇酸)
人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶 Human鹽酸文拉法辛（標(biāo)準(zhǔn)品）Venlaine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
TPST1 Others Human 人 TPST1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸文拉法辛Venlaine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3原卟啉IXProtoporphyrin IX質(zhì)量規(guī)格：>95%
BST2 Others Human 人 TETHERIN / BST2 / CD317 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甲磺酸羅哌卡因（標(biāo)準(zhǔn)品）Ropivacaine mesylate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
原代上皮細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml甲磺酸羅哌卡因Ropivacaine mesylate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
豬嗜血桿菌PCR檢測試劑盒價(jià)格TM4(正常小鼠Sertoli細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2貝美格（標(biāo)準(zhǔn)品）3-ETHYL-3-METHYLGLUTARIMIDE質(zhì)量規(guī)格：含量測定
Hs 746T(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞 腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;AAV-293地喹氯銨（標(biāo)準(zhǔn)品）Dequalinium chloride質(zhì)量規(guī)格：含量測定
人干細(xì)胞因子單克隆抗體細(xì)胞株;AMS2(SCF3)硫酸氫小檗堿（標(biāo)準(zhǔn)品）BERBERINE ACID SULFATE質(zhì)量規(guī)格：含量測定
CD6 Others Rat 大鼠 CD6 / TP120 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 度米芬（標(biāo)準(zhǔn)品）Domiphen bromide質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定
CM-H026人內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL醋酸優(yōu)力司特；醋酸烏利司他Ulipristal acetate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
HCC827(人非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0385MFC-GFP(小鼠前細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-12,9-二丁基-1,10-鄰二氮雜菲(>96.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(HPLC)2,9-Dibutyl-1,10-phenanthroline
人細(xì)胞;AsPC-12,9-二苯基-1,10-菲咯啉(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)2,9-Diphenyl-1,10-phenanthroline
ADAM15 Others Mouse 小鼠 ADAM15 / MDC15 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,9-二氯-1,10-菲羅啉(>97.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T)2,9-Dichloro-1,10-phenanthroline
MDA-MB-453 人癌細(xì)胞3,4,7,8-四甲基-1,10-菲羅啉(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)3,4,7,8-Tetramethyl-1,10-phenanthroline
NCI-H1650人非小細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H1650 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS5,5'-硫代雙水楊酸(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)5,5'-Thiodisalicylic Acid
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
