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產(chǎn)品簡稱：TEV-1細(xì)胞
中文名稱：人滋養(yǎng)層細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：滋養(yǎng)層

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E01576

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：

Humanpunjecellaoaibody,PCA-1/YoELISAKit 人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  (R)-4-Benzyl-2-oxazolidinone  102029-44-7  中文名：(R)-4-芐基-2-惡唑烷酮  分子式：C10H11NO2  度：98.0%   

HumanProinsulin,PIELISAKit 人原(PI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  1-Benzyl L-aspartate  中文名：L-天冬氨酸1-芐酯  分子式：C11H13NO4  度：98.0%

Humanpolymyositis-sclerosisaibody,PM-Scl/PM-1ELISAKit 人抗多發(fā)性肌炎抗體(PM-Scl/PM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  (tert-Butoxycarbonyl)oxycefcapene pivoxil  105889-80-3  中文名：  分子式：C28H37N5O10S2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

Humanpolyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit 人多球蛋白受體(poly-IgR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  1,5,15-Tri-O-methylmorindol  中文名：  分子式：C18H16O6  度：98.0%

HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit人抗副病毒IgG抗體(ai-PIVIgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  2-Amino-6-methylbenzothiazole  2536-91-6  中文名：2-氨基-6-甲基苯并噻唑  分子式：C8H8N2S
酰基呋塞米-β-D-葡萄糖苷酸  Furosemide Acyl-β-D-glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatPRLELISAKit大鼠催乳素(PRL)規(guī)格：96T/48T

ent-加蘭他敏  ent-Galanthamine  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatPro-ANP(1-98)ELISAKit大鼠心肽Pro-ANP(1-98)規(guī)格：96T/48T

差向-加蘭他敏N氧化物  Epi-galanthamine N-Oxide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatPro-ANP(1-98)ELISAKit大鼠心肽Pro-ANP(1-98)規(guī)格：96T/48T

加蘭他敏N氧化物  Galanthamine N-Oxide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱Ratprogesterone(PROG)ELISAkit大鼠孕同(PROG)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

加蘭他敏β-D-葡萄糖苷酸  Galanthamine β-D-Glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱Ratprogesterone(PROG)ELISAkit大鼠孕同(PROG)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

N-去甲基加蘭他敏  N-Desmethyl Galanthamine  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatProgesteroneELISAkit大鼠孕激素(Progesterone)ELISAkit規(guī)格：96T/48T

O-去甲基加蘭他敏  O-Desmethyl Galanthamine  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatProgesteroneELISAkit大鼠孕激素(Progesterone)ELISAkit規(guī)格：96T/48T

O-去甲基加蘭他敏β-D-葡萄糖苷酸  O-Desmethyl Galanthamine β-D-Glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatProinsulinELISAKit大鼠原(PI)規(guī)格：96T/48T

異吉非羅齊（吉非羅齊雜質(zhì)）  iso-Gemfibrozil (Gemfibrozil Impurity)  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatProinsulinELISAKit大鼠原(PI)規(guī)格：96T/48T

吉非羅齊1-O-β-葡萄糖苷酸-d6  Gemfibrozil 1-O-β-Glucuronide-d6  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatProlactinELISAKit大鼠促乳素(Prolactin)規(guī)格：96T/48T
內(nèi)皮生長因子 D(VEGF-D)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D  Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside  171422-82-5  中文名：  分子式：C56H90O19  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

內(nèi)皮生長因子 D(VEGF-D)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside  中文名：  分子式：C56H90O19  度：98.0%

內(nèi)皮生長因子 C(VEGF-C)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender  Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside  中文名：  分子式：C56H90O19 

內(nèi)皮生長因子 A(VEGF-A)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender  Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside  中文名：  分子式：C56H90O19  度：97.5%

內(nèi)皮生長因子 A(VEGF-A)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Androstanolone 17-benzoate  中文名：雄諾龍苯甲酸酯  分子式：C26H34O3
TEV-1細(xì)胞6-Aminoindole  中文名：6-氨基吲哚  分子式：C8H8N2    AmmoniumChloride   500g              

6-Aminoindazole  中文名：6-氨基吲唑  分子式：C7H7N3    乙二醇-雙-(2-基乙基)四乙酸   10g

6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid  中文名：6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S    EGTA   50g

6'-Amino-3',4'-(methylenedioxy)acetophenone  中文名：6'-氨基-3',4'-(亞甲基二氧代)苯乙酮  分子式：C9H9NO3    伊紅Y   25g

6-Amino-1-methyluracil  中文名：  分子式：C5H7N3O2    EosinY,Salt   10x25g
注意事項(xiàng)：
TEV-1細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。